“Robust fusion超保真DNA聚合酶”参数说明
类别: | 分子生物学工具酶 | 用途4: | 复杂模板扩增 |
延伸速率: | 2~4kb/min | 特点: | 高保真、快速扩增 |
扩增片段长度: | 20kb | 用途1: | 高保真PCR |
用途3: | 长片段扩增 | 保真度vstaq: | 50× |
用途2: | 高产量PCR |
“Robust fusion超保真DNA聚合酶”详细介绍
概述:
Robust fusion超保真DNA聚合酶,是经蛋白质工程改造的DNA聚合酶,兼具快速和高保真度的特性,可以在多种PCR反应中使用,在复杂模板条件下也有良好的表现。Robust fusion DNA聚合酶合成DNA的速率为2-4 kb/min,其保真度是普通Taq DNA聚合酶的50倍,是Pfu DNA聚合酶的6倍。Robust fusion DNA聚合酶具有5′→3′DNA聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性,扩增产物为平末端。
来源:
携带有Robust fusion DNA聚合酶基因的E. coli菌株。
应用:
1. PCR。
2. 克隆。
3. 长片段扩增或困难模板扩增。
4. 高通量PCR。
反应条件:
50 μl反应体系中含有:1× Robust fusion HF或GC缓冲液,DNA模板,0.5 μM引物,200 μM dNTPs (不随酶附赠),3% DMSO (可选) 和1 U Robust fusion DNA聚合酶。
质量检测:
核酸内切酶活性:50μl反应体系中,10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时,<10%的pUC19质粒由超螺旋变为缺刻状态。
7.5 kb基因组DNA PCR扩增:50 μl反应体系,1× Robust fusion HF缓冲液,50 ng基因组DNA,1 U Robust fusion DNA聚合酶,200 μM dNTPs和1 μM引物,30个循环PCR扩增出7.5 kb目的片段。
20 kb λDNA PCR扩增:50 μl反应体系,1× Robust fusion HF缓冲液,10 ng λDNA,1 U Robust fusion DNA聚合酶,200 μM dNTPs和1 μM引物,2个循环PCR扩增出20 kb目的片段。
质保声明:
Robust fusion超保真DNA聚合酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1单位指在74°C条件下,反应30分钟能使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
参考文献:
1. Breslauer, K.J. et al. (1986) Predicting DNA duplex stability from the base sequence. Proc Natl Acad SciUSA, 83, 3746-3750.
Robust fusion超保真DNA聚合酶,是经蛋白质工程改造的DNA聚合酶,兼具快速和高保真度的特性,可以在多种PCR反应中使用,在复杂模板条件下也有良好的表现。Robust fusion DNA聚合酶合成DNA的速率为2-4 kb/min,其保真度是普通Taq DNA聚合酶的50倍,是Pfu DNA聚合酶的6倍。Robust fusion DNA聚合酶具有5′→3′DNA聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性,扩增产物为平末端。
来源:
携带有Robust fusion DNA聚合酶基因的E. coli菌株。
应用:
1. PCR。
2. 克隆。
3. 长片段扩增或困难模板扩增。
4. 高通量PCR。
反应条件:
50 μl反应体系中含有:1× Robust fusion HF或GC缓冲液,DNA模板,0.5 μM引物,200 μM dNTPs (不随酶附赠),3% DMSO (可选) 和1 U Robust fusion DNA聚合酶。
质量检测:
核酸内切酶活性:50μl反应体系中,10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时,<10%的pUC19质粒由超螺旋变为缺刻状态。
7.5 kb基因组DNA PCR扩增:50 μl反应体系,1× Robust fusion HF缓冲液,50 ng基因组DNA,1 U Robust fusion DNA聚合酶,200 μM dNTPs和1 μM引物,30个循环PCR扩增出7.5 kb目的片段。
20 kb λDNA PCR扩增:50 μl反应体系,1× Robust fusion HF缓冲液,10 ng λDNA,1 U Robust fusion DNA聚合酶,200 μM dNTPs和1 μM引物,2个循环PCR扩增出20 kb目的片段。
质保声明:
Robust fusion超保真DNA聚合酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1单位指在74°C条件下,反应30分钟能使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
参考文献:
1. Breslauer, K.J. et al. (1986) Predicting DNA duplex stability from the base sequence. Proc Natl Acad SciUSA, 83, 3746-3750.